ანტიციკლური ციტრულინირებული პეპტიდის (CCP) ანტისხეულების ELISA ნაკრები

ეს ნაკრები ადამიანის შრატის ნიმუშებში არაპირდაპირი მეთოდით აფიქსირებს ანტიციკლურ ციტრულინირებულ პეპტიდურ ანტისხეულებს (CCP ანტისხეულები), რომლის გარსის ანტიგენად გამოიყენება გასუფთავებული ციკლური ციტრულინირებული პეპტიდური ანტიგენები.

ტესტირების პროცესი იწყება შრატის ნიმუშის ზემოაღნიშნული გაწმენდილი ანტიგენებით წინასწარ დაფარულ რეაქციის ჭებში დამატებით, რასაც მოჰყვება ინკუბაციის პერიოდი. ამ ინკუბაციის დროს, თუ ნიმუშში არის CCP ანტისხეულები, ისინი სპეციფიკურად ამოიცნობენ და დაუკავშირდებიან მიკროჭეებზე დაფარულ ციკლურ ციტრულინირებულ პეპტიდურ ანტიგენებს, რითაც წარმოქმნიან სტაბილურ ანტიგენ-ანტისხეულების კომპლექსებს. შემდგომი ნაბიჯების სიზუსტის უზრუნველსაყოფად, რეაქციის ჭებში შეუკავშირებელი კომპონენტები იხსნება გარეცხვის პროცესით, რაც ხელს უწყობს შრატში სხვა ნივთიერებების პოტენციური ჩარევის აღმოფხვრას.

შემდეგ, ფერმენტული კონიუგატები ემატება რეაქციის ჭებში. მეორე ინკუბაციის შემდეგ, ეს ფერმენტული კონიუგატები სპეციფიკურად ემაგრებიან არსებულ ანტიგენ-ანტისხეულების კომპლექსებს, რაც ქმნის უფრო დიდ იმუნურ კომპლექსს, რომელიც მოიცავს ანტიგენს, ანტისხეულს და ფერმენტულ კონიუგატს. როდესაც სისტემაში შეჰყავთ TMB სუბსტრატის ხსნარი, კონიუგატში შემავალი ფერმენტი აკატალიზებს ქიმიურ რეაქციას TMB სუბსტრატთან, რაც იწვევს ფერის ხილულ ცვლილებას. ამ ფერის რეაქციის ინტენსივობა პირდაპირ კავშირშია შრატის ორიგინალურ ნიმუშში არსებული CCP ანტისხეულების რაოდენობასთან. და ბოლოს, მიკროპლაკეტის წამკითხველი გამოიყენება რეაქციის ნარევის შთანთქმის (A მნიშვნელობა) გასაზომად. ამ შთანთქმის მნიშვნელობის ანალიზით, შესაძლებელია ნიმუშში CCP ანტისხეულების დონის ზუსტად განსაზღვრა, რაც უზრუნველყოფს სანდო საფუძველს შესაბამისი კლინიკური ტესტირებისა და დიაგნოზისთვის.